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奧林巴斯顯微鏡物鏡的五個基本參數:
1、數值孔徑(NA)
物鏡的數值孔徑表示物鏡收集光線的能力。物鏡對試樣上各點的反射光收集得越多,成像質量就越好,數值孔徑常以N.A.表示.
光學系統的數值孔徑(NA)是一個無量綱的數,用以衡量該系統能夠收集的光的角度范圍。
在光學領域,數值孔徑描述了透鏡收光錐角的大小,而后者決定了透鏡收光能力和空間分辨率。其數值大小分別標在物鏡和聚光鏡的外殼上。
孔徑角又稱“鏡口角”,是物鏡光軸上的物體點與物鏡前透鏡的有效直徑所形成的角度??讖浇窃酱螅M入物鏡的光通亮就越大,它與物鏡的有效直徑成正比,與焦點的距離成反比。顯微鏡觀察時,若想增大NA值,孔徑角是無法增大的,唯一的辦法是增大介質率n值?;谶@一原理,就產生了水浸系物鏡和油浸物鏡,因介質的折射率n值大于1,NA值就能大于1。數值孔徑大值為1.4,這個數值在理論上和技術上都達到了極限。目前,有用折射率高的溴萘作介質,溴萘的折射率為1.66,所以NA值可大于1.4。
與其他參數的關系:數值孔徑是顯微鏡物鏡的重要參數,決定了物鏡的分辨率。與物鏡的放大倍數,工作距離,景深有直接關系。一般來說,它與分辨率成正比,與放大率成正比,焦深與數值孔徑的平方成反比,NA值增大,視場寬度與工作距離都會相應的變小。
容易產生的誤區:數值孔徑與分辨率成正比,但這并不是說在選擇物鏡的時候一定要選擇數值孔徑(NA)大才是好,因為物鏡還會有很多其他重要參數,比如熒光透過率、工作距離等等,好根據自己的實驗選擇。
2、焦深
焦深是物鏡對高低不平的物體能夠清晰成像的能力,當奧林巴斯顯微鏡準確聚焦于某一物面時,如果位于某前面及后面的物面仍然能被觀察者清楚,則該遠兩平面之間的距離就是焦深。物鏡的焦深主要取決于物鏡的數值孔徑。物鏡的數值孔徑越大,其焦深越小。在物鏡的數值孔徑特別大的情況下,顯微鏡可以有很好的分辨率,但焦深很小。因此要根據需要選擇數值孔徑合適的物鏡。當顯微鏡用于高倍觀察時,由于焦深小,只有在金相試樣表面高低差別很小時,才能清晰成像,因而高倍觀察所用的試樣應淺腐蝕。
3、齊焦距離
齊焦距離是指,對準焦點時的物鏡鏡體定位面到物體表面的距離。OLYMPUSUIS2/UIS光學系統物鏡的齊焦距離為45mm,ZEISSICCS光學體統、LEICAHC光學系統的齊焦距離也是45mm,NIKONCFI60光學系統的齊焦距離是60mm。
5、工作距離
物鏡的工作距離是指顯微鏡準確聚焦后,試樣表面與物鏡的前端之間的距離。物鏡的放大率越高,工作距離越短。
鏡檢時,被檢物體應處在物鏡的一倍至二倍焦距之間。因此,它與焦距是兩個概念,平時習慣所說的調焦,實際上是調節工作距離。在物鏡數值孔徑一定的情況下,工作距離短孔徑角則大。數值孔徑大的高倍物鏡,其工作距離小。
5、分辨率
奧林巴斯顯微鏡的分辨率是指能清晰的分辨試樣上兩點間的小距離,通常用d表示。分辨率決定了顯微鏡分辨試樣上細節的程度。顯微鏡的物鏡是使物體放大成一實相,目鏡的作用是使這個實像再次放大,這就是說哦目鏡只能放大物鏡已分辨的細節,物鏡未能分辨的細節,決不會通過目鏡放大而變得可分辨。因此顯微鏡的分辨率主要取決于物鏡的分辨率。
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